實時定量PCR時用的ROXrefence有什麼作用

2022-10-05 22:35:51 字數 839 閱讀 6181

1樓:用曼冬

主要用於校孔差異造誤差

實時熒光定量pcr就是qpcr嗎

2樓:芥末留學

實時熒光定量pcr(qpcr)用什麼試劑盒比較好 加入熒游標記探針,巧妙地把核算擴增、

內雜交、光譜分析和實時容檢測技術結合在一起,藉助於熒光訊號來檢測pcr產物。一方面提高了靈敏度,另一方面還可以做到pcr每迴圈一次就收集一個資料

做實時定量pcr需要校正內參嗎

3樓:南京金益柏生物科技****

既然你半定量就把內參校正好了,好做什麼real-time pcr,直接用半定量的結果就可以說明問題了。

顯然,我的做法是首先半定量確定引物的特異性(單一條帶,亮)其次,根據提取rna的濃度,大致保證反轉錄後所有的樣品濃度較為一致,也可以核酸測定儀準確確定濃度

第三,real-time pcr後將樣品減去內參的ct值,內參本來就是消除誤差的。

實時熒光定量pcr引物怎麼設計

4樓:南京金益柏生物科技****

1、查詢該物種或近緣物種資訊,看是否能確定內含子序列的位置,在cds上設計跨內含子的引物,以避免基因組汙染;

2、擴增片段大小最好在200bp左右,太大會影響擴增效率;

3、最好一次分別設計兩條上游(距離較近)和下游引物(距離較近),組合成4個擴增片段;

4、用任何方法或軟體設計好的引用都要用少量cdna樣本來驗證引物擴增效果:主要是有無二聚體?有無非特異性擴增?

5、篩選出一對最滿意的引物上機,祝你實驗順利。

實時熒光定量PCR的個體重複問題

最好是不要,這樣會減小重複之間的誤差。特別是需定量的樣品,混樣對定量結果的準確性是有影響的 實時熒光定量pcr的重複性好是什麼意思 3個實驗重複的ct值的標準差在0.167以內 abi的標準 我們一般在0.5以內就可以了 實時熒光定量pcr的結果該怎樣分析?1 如果有標準曲線,按照標準曲線計算 2 ...

實時熒光定量pcr加入的cdna的a260 280很低,有影

沒有bai影響,實時熒光定du量pcr quantitative real time pcr 是一種在zhidna擴增反應中,以熒光化dao 學物質測每次聚合版酶鏈式反應 pcr 迴圈 實時熒光定量pcr,cdna的加入量會影響結果的準確度嗎 兩者沒有必然的聯絡,準確度一般是儀器決定的,不同的儀器準...

實時熒光定量PCR可以用來精確測定DNA濃度嗎

不是用來測濃度的,可以用來做基因的拷貝數。測濃度最經典的還是紫外分光光度計,當然會有偏差,不過總體來說還是可以的。也可以用酶標儀。實時熒光定量pcr不是用來測濃度的,可以用來做基因的拷貝數。但是如果你的產物單一,有相應的標準品,也是可以測濃度的,濃度的準確性和你的標準曲線相關。實時熒光定量pcr 實...