實時熒光PCR和高通量PCR是同一意思麼?它們分別是什麼意思

2021-04-17 22:07:42 字數 3855 閱讀 5796

1樓:匿名使用者

realtime pcr 實時熒光定量pcr,常見有taqman探針法、sybr green i 染料法,對樣本中某一基因進行相對或絕對專定量;

高通量pcr是二代測屬序技術,邊合成邊測序,empcr等,通量非常高,是為測序而設計的pcr。

2樓:匿名使用者

不是一個意思。前者是測定某種dna的含量,後者是一次可以擴增很多種dna。

什麼是實時熒光定量pcr?有什麼作用?請詳細說明。

3樓:月光_傾城

好多生物工作做廣告做培訓噢。你怎麼不去看一下。

實時熒光定量pcr與普通pcr的區別是什麼?結果有何異同?能說明的問題是什麼?

4樓:麼破1自我

二者結果相同。都能說明生物體外的特殊dna複製的整個過程的擴增效率和溶解溫度情況。

區別:1、二者系統組成不同

熒光定量pcr儀比普通的pcr儀多了熒光訊號採集系統和計算機分析處理系統。

2、二者原理不同

熒光定量pcr實時監測與dna結合的熒光染料激發的熒光,普通ocr通過檢測插入dna中核算染料的量來測定pcr最終產物量。

3、二者反應要求不同

熒光定量pcr對擴增片段有較高的要求,一般為100-300bp,普通pcr可以擴增長點的片段。

4、二者應用不同

熒光定量pcr主要是用來定量分析和確定基因轉錄水平的,普通的pcr儀是做定性分析和擴增基因片段,定量pcr儀可以做普通pcr儀的工作,反之不行。

5、二者測量成本不同

定量pcr儀**較為昂貴,普通的基因擴增儀(pcr儀)只能夠定性地分析是否存在目標片段。但是**要低很多,而且執行成本也要低很多。

實時熒光定量pcr技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的侷限,實現了每一輪迴圈均檢測一次熒光訊號的強度,並記錄在電腦軟體之中,通過對每個樣品ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。

5樓:匿名使用者

原理不同:熒光定量pcr實時監

測與dna結合的熒光染料激發的熒光;普通pcr通過檢測插入dna中核算染料的量來測定pcr最終產物量,一般是紫外光。

反應要求:熒光定量對擴增片段有較高的要求,一般為100-300bp;普通定量可以擴增長點的片段。如果不需要檢測產物分子量大小,熒光定量可以不進行電泳就對產物進行定量分析,普通pcr必須電泳。

結果:熒光定量可以實現精確定量,普通pcr則不行。熒光定量體現可以看到整個擴增過程,可以看到擴增效率,溶解溫度,直接得到的標準曲線等,這些是普通pcr無法實現的。

如果還不清楚建議去丁香園等**逛逛,希望可以幫到你

6樓:匿名使用者

所謂實時熒光定量pcr技術,是指在pcr反應體系中加入熒光基團,利用熒光訊號積累實時監測整個pcr程序,最後通過標準曲線對未知模板進行「定量分析」的方法。

記住,實時熒光定量是定量分析

7樓:匿名使用者

熒光pcr是為了測量mrna表達量的 普通pcr是為了擴增目的片段的

8樓:匿名使用者

熒光定量是定量的,普通pcr是定性的,結果一個是說明含有多少,另一個說明有還是沒有,前者更精確一點

熒光定量pcr和實時熒光定量pcr還有反轉錄pcr都是什麼呀?有什麼區別,分別是什麼作用啊?謝謝啊

9樓:匿名使用者

實時就是指每個階段的熒光都有收集,其實現在所有的熒光定量pcr儀器都是實時的。熒光定量pcr的英文簡寫是:fq-pcr,f是熒光的縮寫,q是定量的縮寫。

(或者寫成是rt-pcr。rt就是realtime的縮寫)。

做定量pcr的目的是為了瞭解起始模板數的量,這個一下寫不清楚,你看一個說明書絕對看得懂。

而反轉錄pcr就是把mrna反轉錄成cdna,簡寫也是rt-pcr。不過和上面的不同!這個rt是reverse transcript的縮寫!

其實啊,對於做表達量的實驗而言,反轉錄pcr是熒光定量pcr的第一步,很多人是這麼來描述的:rt-qpcr。這個rt就是反轉錄,這個q是指定量。

總之,自己好好看說明書!

10樓:匿名使用者

熒光定量pcr的全稱就是實時熒光定量pcr,是通過熒光值的變化來實時監測每個反應過程中目標產物的累積量,可以絕對定量也可以相對定量。反轉錄pcr是將mrna反轉錄成cdna後做的pcr,可以是普通pcr,也可以用熒光定量pcr

恆溫pcr和實時熒光定量pcr這兩種有什麼區別?哪個更有優勢?

11樓:最純粹的自由

實時熒光定量pcr技術,是指在pcr反應體系中加入熒光基團,利用熒光訊號積累實時監測整個pcr程序,最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

pcr(聚合酶鏈式反應)是利用dna在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經常是60°c左右)時引物與單鏈按鹼基互補配對的原則結合,再調溫度至dna聚合酶最適反應溫度(72°c左右),dna聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。

恆溫pcr和實時熒光定量pcr的不同,是不同在實時熒光定量pcr的系統中加入了熒光染料(sybr green 或taqman 探針等等)。以sybr green為例,這種染料可以結合在雙鏈的dna上,當pcr不斷進行時,每一次退火生成的雙鏈dna也在增加,熒光染料結合也越多,熒光也越強。在機器中有一個探測熒光的探頭,可以定量檢測熒光的強度,轉換成數值。

這樣就可以實時記錄反映體系中dna的反應情況。

熒光pcr更有優勢,因為熒光pcr靈敏度高於恆溫pcr,同樣**也高一些。

12樓:傅浩川

恆溫pcr主要是,確定是否存在一段特異的dna序列。

但是熒光定量pcr是看溶液中特異的pcr序列的濃度。

兩者沒有什麼優勢。一般的可能就是功能簡單但是便宜。主要是便宜熒光的很貴 很貴 不是一般的貴!!

實時熒光pcr方法靈敏度略高於恆溫pcr,但儀器昂貴,試劑消耗也相對更貴,適合向高階客戶推廣;恆溫pcr大部分效能與實時熒光pcr相對,靈敏度稍低於實時熒光pcr,但儀器價效比高,更利於推廣。實際推廣中對高階客戶可以採取用恆溫pcr作為契機,在交流中如客戶對靈敏度有高要求而又有一定實力的可推薦使用實時熒光pcr產品。

13樓:匿名使用者

實時熒光pcr方法靈敏度略高於恆溫pcr,但儀器昂貴,試劑消耗也相對更貴,適合向高階客戶推廣;恆溫pcr大部分效能與實時熒光pcr相對,靈敏度稍低於實時熒光pcr,但儀器價效比高,更利於推廣。實際推廣中對高階客戶可以採取用恆溫pcr作為契機,在交流中如客戶對靈敏度有高要求而又有一定實力的可推薦使用實時熒光pcr產品。

什麼是實時熒光定量pcr,檢測指標是什麼?

14樓:奔馬的香香豬

實時檢測pcr擴增,在擴增的指數期對起始模板進行定量,在擴增過程中,熒光訊號隨著pcr產物的增加而增強。我們實驗室使用的bioghsc super probe kit pcr實驗檢測dna,測得的迴圈數在28左右,整個pcr過程有4個階段,基線期---指數增長期---線性增長期---平臺期,指數增長期內,pcr有高度重複性,一般的檢測指標是看線性圖譜的擴增曲線的起跳值(ct值)。

15樓:錢塘書生

你要檢測什麼東西啊?

實時熒光定量pcr是檢測模板dna的拷貝數、基因表達量、基因突變等的

16樓:閱微基因

所謂實時熒光定量pcr技術,是指在pcr反應體系中加入熒光基團,利用熒光訊號積累實時監測整個pcr程序,最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。參考資料:http:

taqman熒光pcr檢測技術和實時熒光定量pcr技術的

原理不同 熒光定量pcr實時監測與dna結合的熒光染料激發的熒光 普通pcr通過檢測 回插入dna中核算染答 料的量來測定pcr最終產物量,一般是紫外光.反應要求 熒光定量對擴增片段有較高的要求,一般為100 300bp 普通定量可以擴增長點的片段.如果不需要檢測產物分子量大小,熒光定量可以不進行電...

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