ctab法提取植物dna,液氮研磨後,新增ctab提取液這步具體怎樣進行啊,
1樓:網友
多放一點液氮,磨得時間適當長一些。如果你的樣品比較多,在液氮還沒有蒸發前迅速把粉末轉移到ep官管中,然後把它暫時放到-20的冰箱中,等所有的樣品全部磨好後統一加ctab。
你做實驗的時候材料最好儘量新鮮一些,嫩一些;磨得時候材料也不要太多,太多反而不好,ctab不能裂解這麼多材料,同時雜質還比較多。
你說效果不好究竟是怎麼回事,可以把膠圖發過來看嗎?
2樓:少年v包工頭
你可以先用液氮磨,然後再轉移到的ep管裡的,然後迅速的加ctab,dna很難降解的,我個人感覺材料最好放在-80度冰箱,你可以看一下加完ctab溶液後顏色是不是特別怪,因為有些時候材料褐化是影響提取結果的,重點還是在氯仿抽提那一步,得看你是什麼材料了,我們現在磨一般的材料,都不用液氮,直接用儀器磨,特殊的像油茶就得用液氮!
3樓:網友
你什麼意思,應該反覆用液氮磨,當磨成需要的粉末後,為了操作方便再沒有融化前趕快裝進ep管,這時再加ctab去水裕來裂解細胞!你往研缽里加ctab?
ctab提取植物中dna步驟是什麼??
4樓:科創
1)取材料,加液氮研磨成粉末狀,迅速移入 ml eppendorf管中;
2)加入800 μl的ctab提取緩衝液,混勻(ctab在65℃水浴預熱),每5min輕輕**幾次,20min後12000 r/min,離心15 min;
3)小心吸取上清液,加入慶歲等體積的酚:氯仿(各400μl)溶液,混勻,4℃,12000 r/min,離心10 min;
4)小心吸取上清液,加入等體積的氯仿,混勻,4℃,12000 r/min,離心10 min.
5)重複步驟(4)1-2次,以蛋白層不出現為止;
6)取上清,-20℃沉澱1h,4℃,12000 r/min,離心譽運睜10 min;
7)棄去上清液,用70%乙醇洗滌沉澱2次;
8)室溫下乾燥後(一般乾燥5-15 min),溶悄昌於30-50 μl depc去離子水中,於-20℃或者-70℃下儲存備用。,7,ctab提取植物中dna步驟是什麼?
1、從2ml離心管中取樣至小離心管中,加鋼珠。
2,放入液氮冷凍30s,放入**機**。
3.加200微公升ctab(56度),56度恆溫水浴30min.
4.加入200微公升氯仿異戊醇混合液,體積比24:1
5.**,放入搖床30min
6,離心12000/10min,取上層清液70微公升至2ml離心管,滴加47微公升異戊醇(冷凍)
7,加蓋,寫碼,**,4度離心12000/10min
8,倒去液體,晾乾,加入200微公升ddh2o
最好細節再給一下!
採用ctab法提取dna在分子生物學領域的應用
5樓:
ctab法是一種提取植物、真菌、昆蟲等生物樣品的高效dna提取方法。其滑滾基本原理是利用ctab(十六烷基三甲基溴化銨)這種陽離子性表面活性劑與dna結合,並利用酒精沉澱法將dna從其他雜質中分離出來。在分子生物學領域,ctab法已經成為了提取植物基因組dna的常用方法之一。
由於植物細胞壁、色素、多酚類化合物等會干擾dna的提取和純化,而ctab法可以很好地解決這些螞讓念問題。此外,ctab法還可以在提取dna的同時去除rna、蛋白質等,悶困從而得到高質量的法提取的dna可以用於pcr擴增、限制性酶切、基因轉殖等分子生物學實驗中,廣泛應用於植物遺傳學、進化生物學、生物多樣性等領域的研究。
ctab法提取dna步驟及其藥品作用
1 取材料,加液氮研磨成粉末狀,迅速移入1.5 ml eppendorf管中 2 加入800 l的ctab提取緩衝液,混勻 ctab在65 水浴預熱 每5min輕輕 幾次,20min後12000 r min,離心15 min 3 小心吸取上清液,加入等體積的酚 氯仿 各400 l 溶液,混勻,4 1...
ctab法提取dna時,最後一步溶於ddh2o時,要不要用槍吹打啊,還是放著自行
dna提取主要是ctab方法,其他的方法還有物理方式如玻璃珠法 超聲波法 研磨法 凍融法。化學方式如異硫氰酸胍法 鹼裂解法。生物方式 酶法。根據核酸分離純化方式的不同有 矽質材料 陰離子交換樹脂等。提取dna總的原則 1.保證核酸一級結構的完整性 2.核酸樣品中不應存在對酶有抑制作用的有機溶劑和過高...
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