熒光素(螢光黃)可以用來幹什麼

2021-09-29 09:56:06 字數 916 閱讀 5126

1樓:無限遷

免疫熒光法

免疫熒光法的基本原理是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素,當與其相對應的抗原或抗體起反應時,在形成的複合物上就帶有一定量的熒光素,在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位,檢測出抗原或抗體。常用的熒光素有①異硫氰酸熒光素(fluorecein isothiocyante,fitc),為黃色、橙黃色或褐黃色結晶粉末,有兩種異構體,易溶於水和酒精等溶劑。分子量為389,最大吸收光譜為490~495,最大發射光譜為520~530urn,呈現明亮的黃綠色熒光,是最常用的標記抗體的熒光素。

②四甲基異氰酸羅達明(tetrametrylrhodarnine isothiocyante,tritc)是一種紫紅色粉末,較穩定,是羅達明(rhodamine)的衍生物。最大吸收光譜550urn,最大發射光譜620urn呈橙紅色熒光,與fitc發射的黃綠色熒光對比鮮明,常用於雙標記染色。

按照抗原抗體反應的結合步聚,免疫熒光法可分為以下三種。

1.直接法

用熒光素標記的特異性抗體直接與相應的抗原結合,以檢查出相應的抗原成分。

2.間接法

先用特異性抗體與相應的抗原結合,洗去未結合的抗體,再用熒光素標記的抗特異性抗體(間接熒光抗體)與特異性抗體相結合,形成抗原一特異性抗體一間接熒光抗體的複合物。在此複合物上帶有比直接法更多的熒光抗體,所以,此法較直接法靈敏。

3.補體法

用特異性的抗體和補體的混合液與標本上的抗原反應,補體就結合在抗原抗體複合物上,再用抗補體的熒光抗體與之相結合,就形成了抗原一抗體一補體一抗補體熒光抗體的複合物。熒光顯微鏡下所見到的發出熒光的部分即是抗原所在的部位。補體法具有敏感性強的優勢,同時適用於各種不同種屬**的特異性抗體的標記顯示,在各種不同種屬動物抗體的檢測上為最常用的技術方法

2樓:匿名使用者

眼科醫生用來給角膜染色,來判別病情.

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不是用來測濃度的,可以用來做基因的拷貝數。測濃度最經典的還是紫外分光光度計,當然會有偏差,不過總體來說還是可以的。也可以用酶標儀。實時熒光定量pcr不是用來測濃度的,可以用來做基因的拷貝數。但是如果你的產物單一,有相應的標準品,也是可以測濃度的,濃度的準確性和你的標準曲線相關。實時熒光定量pcr 實...

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