1樓：匿名使用者
sds-page電泳後，觀察空質粒和外源基因的重組質粒在大腸桿菌中誘導表達後產生的蛋白帶的差異，然後可以轉膜後用外源基因所編碼蛋白的單克隆抗體做western-blot鑑定即可。
2樓：愛魔術的女孩
dna分子雜交試驗，分子雜交，抗原-抗體實驗
真核表達載體能在大腸桿菌中表達嗎
3樓：我們飛哈
這要看載體是否具有原核啟動子了。
一般的真核表達載體都是穿梭載體，載體上的氨苄青黴素等抗性基因就是可以再原核生物中表達的。但是你連線在載體上的真核基因是不會在原核生物中表達的，因為基因前邊只有載體上的真核啟動子，而且可能基因裡面也會有內含子。
4樓：匿名使用者
絕大多數真核
真核表達載體和原核載體是不一樣的，涉及到一些修飾的地方原核是沒有的。不過生化實驗無絕對的事情，也許有的時候用真核表達載體去做原核表達也有可能會有一點表達。但應該不會出現很高的表達量。
所以說絕大多數真核表達載體是不能在大腸桿菌中表達的
大腸桿菌bl21為什麼可以用來表達蛋白?
5樓：匿名使用者
不行的，一般克隆bai用菌如dh5α，du質粒高拷貝zhi，但誘導表達就不行dao。bl21等典型表達專菌株，用於高效屬表達克隆於含有噬菌體t7啟動子的表達載體（如pet系列）的基因。t7噬菌體rna聚合酶位於λ 噬菌體de3區，該區整合於bl21的染色體上。
人體內蛋白質的種類很多，性質、功能各異，但都是由20多種氨基酸（amino acid）按不同比例組合而成的，並在體內不斷進行代謝與更新。
6樓：無人之域
一般bai
克隆用菌如dh5α，du質粒高拷貝，但誘導表達zhi就不行。bl21等典型表達dao
菌株，用內於高效表達克隆於含有噬菌
容體t7啟動子的表達載體（如pet系列）的基因。t7噬菌體rna聚合酶位於λ 噬菌體de3區，該區整合於bl21的染色體上。
不好意思粘了一些內容。
bl21如果用於儲存質粒，質粒可能突變，提質粒也不好，提到的質粒可能還會影響下一步操作如酶切。
具體可以google查下，有篇講菌株選擇的文章不錯，發給你也可以
大腸桿菌表達蛋白 什麼時候收細胞
含有t7或sp6啟動子質粒為什麼只能在大腸桿菌菌株中發揮作用? 20
7樓：幽默對聯
t7啟動子是當今大腸桿菌表達系統的主流，這個功能強大兼專一性高的啟動子經過巧妙的設計而成為原核表達的首選，尤其以novagen公司的pet系統為傑出代表。
1、強大的t7啟動子完全專一受控於t7 rna聚合酶，而高活性的t7 rna 聚合酶合成mrna的速度比大腸桿菌rna聚合酶快5倍——當二者同時存在時，宿主本身基因的轉錄競爭不過t7表達系統，幾乎所有的細胞資源都用於表達目的蛋白；
2、誘導表達後僅幾個小時目的蛋白通常可以佔到細胞總蛋白的50%以上。由於大腸桿菌本身不含t7 rna 聚合酶，需要將外源的t7 rna 聚合酶引入宿主菌，因而t7 rna 聚合酶的調控模式就決定了t7系統的調控模式——非誘導條件下，可以使目的基因完全處於沉默狀態而不轉錄，從而避免目的基因毒性對宿主細胞以及質粒穩定性的影響；
3、通過控制誘導條件控制t7 rna 聚合酶的量，就可以控制產物表達量，某些情況下可以提高產物的可溶性部分。有幾種方案可用於調控t7 rna 聚合酶的合成，從而調控t7表達系統。
8樓：匿名使用者
t7 啟動子本是侵染大腸桿菌的t7噬菌體的啟動子。我們常用的表達菌（rosetta、bl21）是由普通的e. coli strain k12認為加入能夠識別t7啟動子的病毒性t7 rna聚合酶，從而讓含有t7啟動子的質粒（如pet、pgem）能成為表達載體。
普通的大腸桿菌自身並不識別t7.
sp6啟動子作用機制與t7近似
9樓：匿名使用者
寫錯地方了吧?
可能是這類 啟動子質粒 最初是在大腸桿菌中發現的,其發揮作用也必須要用到一定的條件,估計只有大腸桿菌才具備裡面的具體條件吧.
值得實驗研究一下.
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