1樓:迎春虎生活人
近年來,高效液相色譜儀技術發展較快,尤其在環境監測中得到廣泛應用。在發達國家更是將高效液相色譜方法作為常用的環境監測方法,如美國epa531方法,用高效液相色譜儀配置螢光檢測器測定飲用水中的n—甲基氨基甲酸酯殺蟲劑;epa547方法用高效液相色譜/螢光法測定飲用水中的草甘膦;epa550方法用高效液相色譜/uv和螢光法測定飲用水中的多環芳烴;epa605方法是用高效液相色譜儀中電化學法測定廢水中的聯苯胺類化合物;epa610方法用高效液相色譜/uv和螢光法測定廢水中的多環芳烴;epa6610方法裡用高效液相色譜柱後衍生螢光法測定廢水中的氨基甲酸酯農藥;epa6651方法用高效液相色譜方法測定廢水中的草甘膦除草劑;epa8310方法用lc/螢光分析固體廢棄物中的多環芳烴,就連氣體中的有害有機物不少也是用高效液相色譜方法測定。(魯創儀器)
2樓:匿名使用者
天龍八部按鍵逍遙遊版本按鍵用不了?開啟了一下就自動關了~沒反應了。
高效液相色譜法對測試樣品有什麼要求
3樓:網友
如果高效液相色譜儀的檢測器是紫外檢測器的話,首先要保證樣品具有紫外吸收,如內果沒有紫外吸收的。
容話可選擇螢光檢測器、蒸發光檢測器等等,總而言之需要你的樣品主成分在檢測器上有響應訊號。
樣品在進行檢測前還要配製成一定濃度的溶液(配製溶液的時候需根據樣品的溶解度情況選擇合適的溶劑,為了減小溶劑峰,通常使用流動相作為溶劑,樣品溶液的濃度一般配製成10ug/ml左右的就可以),如果樣品溶解很好且沒有其他雜質,可直接吸取樣品溶液進樣,如果樣品中還有其他成分,比如測定口服藥物製劑中某成分的含量,往往口服藥物製劑中有其他輔料,樣品溶液在進樣前還要進行一下過濾(通常採用或的針頭式過濾器)。
高效液相色譜法用於含量測定的原理是什麼?
4樓:天然槑
原理是該物質(的官能團。
在某一特定波長下有吸收,並且,該物質濃度和峰面積成正比。即:a樣品/a對照=c樣品/c對照。
c,為濃度,可以理解成c=質量(mg)*純度(%)/稀釋倍數(ml)
所以在使用標準品進行含量標定的時候,標準品的純度是已知的量,稱取一定量標準品後進行定容稀釋。進樣分析後,峰面積可從圖譜上讀取(a樣品).
樣品也稱取一定的質量,稀釋後進樣分析。然後讀取峰面積(a對照).公式中之後樣品純度是未知數,最後計算結果。
也有情況是在沒有標準品的情況下用面積歸一化法計算的,就是進樣後從圖譜上讀取雜質,按照峰面積的百分比計算。這種方式有很大的侷限性,故不經常使用。
用高效液相色譜檢測含量時,為了獲得理想的色譜圖,可對+哪些進行適當改變。
5樓:
用高效液相色譜檢測含量時,為了獲得理想的色譜圖,可對+哪些進行適當改變。
為了獲得理想的色譜圖,可以適當改變以下引數:1. 流動相:
可以嘗試不同比例的有機溶劑和水,或者使用不漏頌爛同種類的緩衝返漏劑。2. 流速:
可以嘗試不同的流速,以獲得最佳分離效果。3. 注射量:
可以嘗試不同的樣品注射量,以避免過載和最大程度地分離組分。4. ph值:
如果分析的是離子化合物,可以嘗試在不同的ph值下進行分析。5. 柱溫:
可以嘗試不同的柱溫,以改變分離效果。6. 柱子:
可以嘗試使用不同種類的柱子,以改善分離效果。7. 檢測器:
可以嘗試櫻襪使用不同種類的檢測器,以獲得最佳檢測效果。
液相色譜法有幾種型別?在這些型別的應用中,最適宜分離的物質是什麼
6樓:網友
從色譜分離角度講,分為正相色譜和反相色譜,反相色譜應用較廣,目前大部分方法都是使用反相色譜,可以分離大部分常見物質;正相色譜由於其色譜柱的**及苛刻的使用條件限制了其發展,但在分離異構體,尤其是手性異構體時仍然具有不可替代性。
在正相色譜中,一般採用極性鍵合固定相,矽膠表面鍵合的是極性的有機基團,鍵合相的名稱由鍵合上去的基團而定。最常用的有氰基(-cn)、氨基(-nh2)、二醇基(diol)鍵合相。流動相一般用比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機溶劑,如烴類溶劑,或其中加入一定量的極性溶劑(如氯仿、醇、乙腈等),以調節流動相的洗脫強度。
通常用於分離極性化合物。一般認為正相色譜的分離機制屬於分配色譜。組分的分配比k值,隨其極性的增加而增大,但隨流動相中極性調節劑的極性增大(或濃度增大)而降低。
同時,極性鍵合相的極性越大,組分的保留值越大。
該法主要用於分離異構體,極性不同的化合物,特別是用來分離不同型別的化合物。
反相鍵合相色譜法。
在反相色譜中,一般採用非極性鍵合固定相,如矽膠-c18h37(簡稱ods或c18)矽膠-苯基等,用強極性的溶劑為流動相,如甲醇/水,乙腈/水,水和無機鹽的緩衝液等。
目前,對於反相色譜的保留機制還沒有一致的看法,大致有兩種觀點:一種認為屬於分配色譜,另一種認為屬於吸附色譜。
分配色譜的作用機制是假設混合溶劑(水+有機溶劑)中極性弱的有機溶劑吸附於非極性烷基配合基表面,組分分子在流動相中與被非極性烷基配合基所吸附的液相中進行分配。吸附色譜的作用機制是把非極性的烷基鍵合相,看作是在矽膠表面上覆蓋了一層鍵合的十八烷基的「分子毛」,這種「分子毛」有強的疏水特性。當用水與有機溶劑所組成的極性溶劑為流動相來分離有機化合物時,一方面,非極性組分分子或組分分子的非極性部分,由於疏溶劑的作用,將會從水中被「擠」出來,與固定相上的疏水烷基之間產生締合作用。
另一方面,被分離物的極性部分受到極性流動相的作用,使它離開固定相,減少保留值,此即解締過程。顯然,這兩種作用力之差,決定了分子在色譜中的保留行為。.
一般地,固定相的烷基配合基或分離分子中非極性部分的表面積越大,或者流動相表面張力及介電常數越大,則締合作用越強,分配比也越大,保留值越大。在反相鍵合相色譜中,極性大的組分先流出,極性小的組分後流出。
高效液相色譜有幾種定量方法?其中那種是比較精確的定量方法?並簡述?
7樓:覀覀覀瓜瓜瓜
峰面積法、峰高法、歸一法、外標法。峰面積法是比較精確的定量方法。
簡介:高效液相色譜法(highperformanceliquidchromatography\hplc)又稱「高壓液相色譜」、「高速液相色譜」、「高分離度液相色譜」、「近代柱色譜」等。它是在生化和分析化學中常用的柱層析儀。
高效液相色譜是色譜法的乙個重要分支,以液體為流動相,採用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相幫浦入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離後,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。該方法有效方便快捷地解決化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中得出想要的資料,成為重要的分離分析技術。
.高效液相色譜法與經典液相色譜法的主要區別在於
8樓:暴走少女
一、型別不同。
1、高效液相色譜法。
1)吸附色譜法(adsorption chromatography)
2)分配色譜法(partition chromatography)
3)離子色譜法(ion chromatography)
4)分子排阻色譜法/凝膠色譜法(size exclusion chromatography)
5)鍵合相色譜法(bonded-phase chromatography)
6)親和色譜法(affinity chromatography)
2、經典液相色譜法。
1)吸附色譜法。
吸附色譜法的固定相為吸附劑,色譜的分離過程是在吸附劑表面進行的,不進入固定相的內部。
2)分配色譜法。
這種色譜的流動相和固定相都是液體,樣品分子在兩個液相之間很快達到平衡分配,利用各組分在兩相中分配係數的差異進行分離,類似於萃取過程。
3)離子交換色譜。
離子交換色譜通常用離子交換樹脂作為固定相。一般是樣品離子與固定相離子進行可逆交換,由於各組分離子的交換能力不同,從而達到色譜的分離。
二、特點不同。
1、高效液相色譜法。
高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。
高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析乙個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小於1小時。
高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果,比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
2、經典液相色譜法。
以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。
三、應用不同。
1、高效液相色譜法。
由於高效液相色譜法具有高解像度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反覆利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域,並已成為解決生化分析問題最有前途的方法。
2、經典液相色譜法。
液相色譜是常溫操作,不受樣品揮發度和熱穩定性的限制,它非常適合相對分子量較大,難汽化,不易揮發或對熱敏感的物質、離子型化合物和高聚物的分離分析,大約佔有機物的70%~80%。
9樓:網友
經典液相(柱)色譜法使用粗粒多孔固定相,裝填在大口徑、長玻璃柱管內,流動相僅靠重力流經色譜柱,溶質在固定相的傳質、擴散速度緩慢,柱入口壓力低,僅有低柱效,分析時間冗長。
高效液相色譜法使用了全多孔微粒固定相,裝填在小口徑、短不鏽鋼柱內,流動相通過高壓輸液幫浦進入高柱壓的色譜柱,溶質在固定相的傳質,擴散速度大大加快,從而在短的分析時間內獲得高柱效和高分離能力。
高效液相色譜壓力不穩定怎麼解決,液相色譜的保留時間總是不穩定,該怎麼解決?
有幾種可能,一個是進氣泡了,這個只能排氣,爭取把氣泡趕出去專。一個是單向閥不穩定屬,這個就是卸下來用10 甲醇超聲一下。再有可能是混合池出現了問題,如果是ab泵,最好混合之後過濾流動相,然後試試單泵情況如何。混合池清洗很麻煩,最好不要自己嘗試。液相色譜的保留時間總是不穩定,該怎麼解決?溫度控copy...
氣相色譜基線問題,高效液相色譜基線的各種問題
樓主,沒點火為吹bai就很高什麼du 意思?說具體點,噪聲zhi大dao的原因比較多,有回 汙染或者氫火焰 根據你的柱子型號 和設兩個升溫程式進行老化柱子 等基線很平以後在進樣 如果換不行的話 換氣在看看 柱子問題或者老化溫度及時間不夠 也有可能是柱子不乾淨了。重新老化一下試試看。試試通氮氣300度...
高效液相色譜圖中的兩個峰沒有完全分開是什麼原因造成的呀
通常情況下 首先會考慮調整流動相的比例 您如果用的反相色譜 應減少有機相,具體如何調整應參考3的原理,就是有機相減少,保留時間變長,如果原來是30 的有機相,現在減為20 目標峰的保留時間會延長為原來的三倍 也有可能是柱子完了,峰分叉 原因主要有幾種 1 流動相不合適,更換流動相及重新摸配比。2 可...