用酶標儀檢測兩個波長,乙個參比波長,乙個波長,怎麼算抑制率

2025-01-19 08:00:30 字數 1129 閱讀 2316

1樓:網友

酶標儀雙波長讀板時同一塊板會出現一些資料,以bio-rad酶標儀為例,當設定雙波長後,結果會出現raw data和result data,raw data是波長的原始資料,而result-data是波長減去參比波長後的資料,計算抑制率應以result data為依據。設定參比波長是在波長的基礎上降低本底及非特異性背景的干擾。

2樓:13249187519證

實驗中波長的選擇主要依賴於你要測的樣品。樣品在不同的波長下,對光的吸收值也不同,但都有乙個吸收峰,一般選擇吸收峰時的波長進行實驗。比如同樣是mtt法做細胞毒性實驗,就有使用490nm和570nm兩種波長選擇,如果使用了dmso作為試劑,在溶解後呈紫(紅)色,在490nm有最大吸收值;而對於sds和酸化異丙醇,則選用570nm(655nm作為參考波長)。

酶標儀波長設定還要看你用的是什麼酶標儀,如果是光柵式單色器(可以1nm步進調節),就可以直接設定吸收峰的波長;如果是濾光片式單色器,因為受濾光片波長限制,有時你就需要選接近使用波長的濾光片,比如655nm,你就可能選用650nm的濾光片。

3樓:淪低僥

1l,人家沒問你酶標儀是什麼,人家有說明書好吧?混分也得有點素質啊。 lz,酶標儀測定elisa比luciferase方便多了,因為不用加樣啊。

你在96孔板上顯色之後,加終止液,然後直接在機器上設好吸光度就測了,一塊板1分鐘就測完了。 比如,你是hrp-tmb顯色,就設定吸光度為450nm,shake 5秒,然後每個孔1秒,測下去就好了。滿意。

普通酶標儀測定時為什麼選擇雙波長測定

4樓:匿名使用者

普廳友亮通酶標儀測定時為什麼選擇雙波長測定。

酶標儀判讀結果是每個孔吸光度的值,所以一般可以分為單波長和雙波長測量,用單波長測量時,96孔微板會留乙個空白孔。因為孔的吸光度值包括了孔壁+實驗體,為了得出實驗體的值,必須留乙個空白告消孔測試出孔壁值,結果扣減。但由於每個孔不可能完全一樣,科學來講不能用乙個孔吸光度值代表所有的,所以酶標儀才扮寬有了雙波長。

雙波長的意思是,會有兩次不同波長來測總值,第二個波長只測孔壁吸光度值,結果每個孔各自扣減得出結果。理論上結果更為科學和準確。市面上單波長儀器有hebe酶標儀,進口的有sunrise酶標儀。

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