pcr電泳出現模糊團狀條帶是什麼原因造成的

2021-12-24 17:09:00 字數 1167 閱讀 4181

1樓:燈下草蟲

主帶顯著的情況下,很可能是引物聚合體。如果沒有出現顯著的你想要的主帶,則是非特異擴增產物。第一種情況沒事不用理會,第二種情況需要篩查模版中與引物的非特異性互補區,重新設計引物,或者升高退火溫度試試。

2樓:匿名使用者

how is the bands of your dna standards, are they sharp? if not, then the problem is your gel. if your gel is ok, then repeat your pcr with higher annealing temperature.

anther possible cause is your primers are not so specific, therefore, there are some non-specific pcr products. then, try pcr with new primers.

pcr條帶模糊是什麼原因?

3樓:匿名使用者

博凌科為-為你解答:看這個感覺是沒有擴增,可以調整模板的量,或者降低退火溫度試試。建議做一個正對照,一起pcr跑電泳!

pcr電泳出現多條帶

4樓:奧力奧

這是引物的特異性問題

需要重新設計引物

提高退火溫度沒用 現在是序列太多 而不是退火和延伸的事

pcr目的條帶出現雜帶,是什麼原因

5樓:南京金益柏生物科技****

紅線上條帶應該是目的條帶(目的基因引物是生工免費合成的)出現的位置(從左到右梯度50,52,54,55,56,58),但是目的基因雜帶太多了。為了說明操作沒有問題,圖中紅箭和圓圈頭分別是我們課題組前期已經證實好用的另一基因和gapdh內參,另一基因和內參出現的位置正確。marker是1000bp,產物大小是362bp。

一,        操作應該沒有問題,不然另一基因和內參也不會ok,

二,        是不是目的基因引物的問題呢?我的pcr條件是:預變性94度5min,(變性94度30s、退火梯度50,52,54,55,56,58,時間30s、延伸72度30s,35cycles),延伸72度10min

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