如何從rt qpcr結果選合適的濃度

2021-04-21 10:18:23 字數 1142 閱讀 2698

1樓:任性的人生樂園

提rna你會吧。。。 反轉錄你會吧。。。如果只是檢測一般的mrna的表達量 就用poly t反轉錄就可以了 如果專是特殊的必須去屬另外合成特異引物 如果你想得到確切的濃度值 那必須在做rt的時候檢測一個標準品 就是這裡面東西的濃度你是確切知道的 然後做一條標準品曲線 然後拿你要檢測的那個得到的值帶到那個曲線裡面就算出濃度了 大部分時候都是檢測相對含量 就是這個mrna在不同東西里面的比較 那就不用做標準品曲線 直接把得到的幾個值比較下關係就可以了 大部分檢測用的內參都是gapdh 其他還有u6 u7可選

如何選擇絕對定量rt-pcr的資料統計分析方法 5

2樓:匿名使用者

根據正態、方差齊、樣本量等選擇分析方法

我替別人做這類的資料分析蠻多的

幾個標本之間做rt-pcr為什麼要把rn的濃度調成一致

3樓:南京金益柏生物科技****

在做抄qrt-pcr時,一定要有內參,即在pcr時,每個bai標本都要做對應的du內參,而且每次都是看家基因,一zhi般用

daobate-actin,有時也用gapdh。

內參的選擇:普通pcr內參的大小沒有多大要求,但real time一般選擇300bp以下。

它的作用在於你提取的rna逆轉錄成cdna時,加入的濃度可能會不一致,即使用分光廣度計測其濃度,也會有儀器誤差,跑出的條帶要進行灰度分析。用目的基因的積分光密度比上內參的光密度就是你這個基因實際表達的量。

希望對你有所幫助。

如何用rt-qpcr檢測rna濃度

4樓:匿名使用者

提rna你會吧。。。 反轉錄你會吧。。。如果只是檢測一般的mrna的表達

量 就用poly t反轉錄就專可以了 如果是特殊

屬的必須去另外合成特異引物 如果你想得到確切的濃度值 那必須在做rt的時候檢測一個標準品 就是這裡面東西的濃度你是確切知道的 然後做一條標準品曲線 然後拿你要檢測的那個得到的值帶到那個曲線裡面就算出濃度了 大部分時候都是檢測相對含量 就是這個mrna在不同東西里面的比較 那就不用做標準品曲線 直接把得到的幾個值比較下關係就可以了 大部分檢測用的內參都是gapdh 其他還有u6 u7可選

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