用流式細胞儀檢測各個象限的意義我用流式細胞儀檢測了CD4,CD8,圖怎麼看,各象限表示什麼

2021-03-05 21:57:39 字數 2009 閱讀 4092

1樓:黑夜有眼眶

左上象限為壞死細胞,左下象限為正常細胞,右上象限為早期凋亡細胞,右下象限為晚期凋亡細胞。

2樓:鄧教諾香桃

要看你是什麼染料標記了

例如臨床上,最常用的熒光染料主要有三大種:

fitc、pe和pecy5。肉眼觀察,fitc為綠色;pe為橙色;

pecy5為紅色。它們都在488奈米被激發。檢測波長分別是:

fitc是525奈米;pe是575奈米;pecy5是675奈米。實際上,熒光的變化是在一個範圍內。這時候,熒光之間有可能重疊,需要進行熒光補償的調節。

所以可以看到,例如fitc和pe、pi,它們發出的波長有交叉,要想檢測fitc,需要把pe和pi的訊號去掉,也就是熒光補償需要調節的意義。在臨床上也是常常用兩種熒光染料直接染色細胞,從而可以得到細胞更多的資訊。例如在檢測b細胞和t細胞的時候,可以用cd3和cd19同時加在試劑,可以同時與細胞進行孵育。

我們將cd3標記成fitc,cd19標記成pe。有的淋巴細胞只表達cd3,有的細胞表達cd19;這樣,我們就可以檢測到cd3陽cd19陰的細胞就是t淋巴細胞;而cd3陰cd19陽的細胞就是b淋巴細胞。這樣我們能夠得到更有效的資料分析。

用流式細胞儀檢測各個象限的意義

3樓:匿名使用者

要看你是什麼染料標記了例如臨床上,最常用的熒光染料主要有三大種: fitc、pe和pecy5。肉眼觀察,fitc為綠色;pe為橙色; pecy5為紅色。

它們都在488奈米被激發。檢測波長分別是:fitc是525奈米;pe是575奈米;pecy5是675奈米。

實際上,熒光的變化是在一個範圍內。這時候,熒光之間有可能重疊,需要進行熒光補償的調節。所以可以看到,例如fitc和pe、pi,它們發出的波長有交叉,要想檢測fitc,需要把pe和pi的訊號去掉,也就是熒光補償需要調節的意義。

在臨床上也是常常用兩種熒光染料直接染色細胞,從而可以得到細胞更多的資訊。例如在檢測b細胞和t細胞的時候,可以用cd3和cd19同時加在試劑,可以同時與細胞進行孵育。我們將cd3標記成fitc,cd19標記成pe。

有的淋巴細胞只表達cd3,有的細胞表達cd19;這樣,我們就可以檢測到cd3陽cd19陰的細胞就是t淋巴細胞;而cd3陰cd19陽的細胞就是b淋巴細胞。這樣我們能夠得到更有效的資料分析。

4樓:鄭舉敦

左下為正常細胞,左上為壞死細胞;右上為晚期凋亡細胞,右下為早期凋亡細胞。

我用流式細胞儀檢測了cd4,cd8,圖怎麼看,各象限表示什麼

5樓:匿名使用者

你的圖呢,先貼一下圖吧,不然只能猜了。

檢測cd4和cd8,應該還要同時染色cd3. 先選中cd3陽性的細胞(t細胞),然後把t細胞在cd4/cd8的散點圖上再顯示,可以分為四個象限。分別代表cd4陽性,cd8陽性,雙陽性,和無染色的。

正常情況下,是不應該有雙陽性和未染色的,也就是說你的細胞應該只顯示在4個象限的其中的兩個。其他的兩個最多隻是一些背景的雜訊號。代表t細胞的兩個亞群。

如何根據流式細胞儀出的檢測圖判斷細胞型別

6樓:匿名使用者

這個問題問的太大了。時間情況是很複雜的。舉個例子。

如果是去紅細胞的外周血白細胞。在fsc-ssc散點圖上,不用染色就可以區分淋巴細胞,單核細胞和粒細胞。而其他的細胞型別,是必須吐過特異性的標誌物染色才能確定的。

用流式細胞儀檢測cd4 cd8 怎麼做啊 準備什麼

7樓:匿名使用者

這個是t細胞表面標記。

所以要準備好:

被測樣本的單細胞懸液。可以是去紅細胞的血細胞,分離的淋巴結或者脾臟的細胞

準備4個管子,分別為無染色,單染cd3, 單染cd4和單染cd8,每管至少準備10-20萬細胞。用來設定機器和***pensation

同樣的方法,用三種抗體同時染樣本

分析結果。

典型的結果一般和下圖類似

流式細胞儀的原理和操作過程,流式細胞儀檢測的原理

原理 流式細胞儀可同時進行多引數測量,資訊主要來自特異性熒光訊號及非熒光散射訊號。測量是在測量區進行的,所謂測量區就是照射鐳射束和噴出噴孔的液流束垂直相交點。液流 的單個細胞通過測量區時,受到鐳射照射會向立體角為2 的整個空間散射光線,散射光的波長和入射光的波長相同。散射光的強度及其空間分佈與細胞的...

流式細胞儀檢測細胞週期DNA含量結果圖怎樣分析和說明

看你用什麼染色了,如果只是pi的話,見圖1。如果用annexin v fitc和碘化丙啶染色的話,正常的活細胞不被annexin v fitc和碘化丙啶染色 圖2左下角 凋亡早期的細胞僅被annexin v fitc染色,碘化丙啶染色呈陰性 圖2右下角 壞死細胞和凋亡晚期的細胞可以同時被annexi...

紅色熒光染料pkh26走流式細胞儀的apc嗎

不能。這個熒光染料需要黃綠鐳射來激發 最大激發波長是551nm 最強光譜在567.所以在有黃綠鐳射的機器上,使用pe通道檢測。有人用過pkh26熒光染料嗎 不能。這個熒光染料需要黃綠鐳射來激發 最大激發波長是551nm 最強光譜在567.所以在有黃綠鐳射的機器上,使用pe通道檢測。請問各種染料對應的...