為什麼pcr產物可以直接連t載體

2021-03-04 05:11:02 字數 563 閱讀 8372

1樓:匿名使用者

普通的taq聚合酶會在pcr反應過程中在3』末端加入一個鹼基a,線性化平末端t載體的兩端分別又人工加上一個額外的t鹼基,從而可與pcr克隆產物的a末端互補配對,提高了pcr產物連線和克隆的效率。

pcr產物與t載體連不上 求助

2樓:南京金益柏生物科技****

前一段時bai間我也是,不du知道為毛,t-a克隆就是不成zhi功。。。以前的以dao前輕鬆的事情,前段內時間就是塞不進容去。後來,我試了平末端克隆,反而長菌了。。

菌落數比較少,但是陽性率還行。

由於平末端克隆試劑盒一般小貴,所以我把某個試劑盒提供的載體改造了,只要用ecorv酶切就是平端載體,如果用eam1101i酶切就是t載體。。嗯。。這樣就不用再買t載體或者平端載體了。。

哇咔咔。。如果你需要的話站短我吧

為什麼pcr產物要先連在t載體上

3樓:匿名使用者

t載體是一種克隆載體,連結後先得到較多的拷貝,可以提高連結表達載體的效率。

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