2 甲醛溶液在微絲的免疫螢光實驗的作用

1樓：孤獨終老

一、成纖維細胞微絲的染色及其對細胞松馳素b的反應。

一)原理。微絲普遍存在於多種細胞，對細胞的形狀和運動有一定作用。細胞松馳素b可與微絲的亞單位肌動蛋白結合，從而破壞微絲，改變細胞的形狀。

二)細胞松馳素b處理成纖維細胞與染色觀察。

1、在平皿中有三張成纖維細胞貼壁生長的蓋片，在超淨工作臺內將一張蓋片移入另一皿中繼續培養，用作對照。

2、在有兩片的平皿內加100μg/ml的細胞鬆弛素b 4滴繼續培養半小察宴時。

3、將用細胞鬆弛素b處理過的兩張蓋片取一張做染色處理，另一張用培養液洗五次（在平皿內換五次培養液，每次都要搖動），繼續培養、觀察。兩小時後細胞形狀恢復，接近正常。

4、對恢復的蓋片與第一張沒用藥的蓋片一同做染色處理。

5、染色處理。

將需染色的蓋片放入盛有pbs的平皿內用吸管輕輕吹洗蓋片，換液三次，每次3分鐘，洗去培養液。

將蓋片移入2％triton x-100液，薯賣置37℃恆溫箱內處理20～30分鐘，以提取骨架以外的蛋白質，使骨架影象清晰。

立刻將蓋片移入m-緩衝液，換洗三次，每次3分鐘。m一緩衝液有穩定細胞骨架的作用。

將蓋片移入3％戊二醛固定15分鐘。

將蓋片移入考馬斯亮蘭染液中，染色15分鐘。然後小心地用自來水沖洗，空氣乾燥。

三)結果。光鏡觀察，微絲聚整合的張力纖維束被染成藍色。在沒用藥的標本上，成纖維細胞多數有突起，微絲沿突起規則排列；用細胞松馳素b處理的標本，由於微絲被破壞突起縮回，多數細胞形狀變圓；用藥處理後又洗去藥的標本，由於解除了藥的作用，肌動蛋白重新聚臺形成微絲，細胞形狀恢復正常。

二、麗藻細胞內胞質環流及其對細胞鬆弛素b的反應。

一)原理。麗藻細胞大，整個細胞的**為大液泡佔據。靠近液泡是一層溶膠樣流動的內質，在內質與質膜之間，為靜止的外質，其中含有葉綠數沒逗體。

內質中含有許多顆粒，可以清楚地看到胞質環流。在麗藻細胞中的微絲與胞質環流有密切關係。成束的微絲出現在外質與內質介面(溶膠和凝膠介面)並交織一起，與環流方向平行。

用細胞鬆弛素b處理後，就可抑制胞質的環流運動。

2樓：吾安琪

2%甲醛溶液在微殲雀絲的免疫熒氏肢早光實驗的作用是非離子型表面活性劑，在4%多聚甲醛固定過程中起著增加細胞膜通透性的作用！

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3樓：網友

螢光免疫染色和dapi染色實驗1．實驗目的學習和掌握螢光免疫染色實驗和dapi染色的主要原理和方法，學習櫻薯利用這兩種方法識別細胞內特異性的基因表達和觀察特異基因在細胞內的定位情況，脊此者從觀察結果可以初步推斷基因的功能，並且該兩種技扒陸術組合運用還可以用來檢測外源基因轉染後的表達情況。

4樓：梨汁不李

2%甲醛溶液在微絲的免疫螢光實驗的作用是非離子型表面活性劑，在4%多聚甲。