1樓：匿名使用者
你再多挑些斑試試，真核質粒不表達，很多時候是因為轉染效率太低。我們這有挑了將近100個才找到表達的
2樓：匿名使用者
其實密碼子atg前面的鹼基是什麼？
3樓：匿名使用者
先做個real time看有沒有轉錄唄
真核表達杆粒提取後測序無訊號是什麼原因
4樓：門窗領航人
根據瞬時表來達的定義，即瞬自時轉染後的初期，質粒bai或dudn**段是遊離在細胞中
zhi的，能夠進行表達，成為瞬dao時轉染表達。而桿狀病毒表達系統中的外源蛋白表達是隨著桿狀病毒在昆蟲細胞中複製擴增的過程中表達的。所以，個人認為這個不屬於瞬時表達。
也許應該叫桿狀病毒介導的外源蛋白的表達吧。
真核表達載體轉染293，序列都正確，不表達是什麼原因
為什麼我構建的真核表達載體高表達mrna卻檢測不到目的蛋白
5樓：匿名使用者
有的時候在不同的copy表達體系裡bai
面對蛋白的表達量是du有影響的。
zhi當構建完成後攜帶有信
dao號肽的時候，一些蛋白在真核表達體系中表達量極低。去除訊號肽序列值後，直接表達成熟肽，表達水平明顯提高。
所以說構建的真核表達載體高表達mrna卻檢測不到目的蛋白是完全有可能的。
6樓：
三人行，必有我師焉。擇其善者而從之，其不善者而改之。
真核過表達質粒，原核過表達質粒的區別~急求~~
7樓：學雅思
一、指代不同
1、真核過表達質粒：真核細胞表達載體之一為pegfp-n1載體，具有對方面的優點。pegfp-n1載體上攜帶有egfp蛋白表達基因。
2、原核過表達質粒：能攜帶插入的外源核酸序列進入原核細胞中進行表達的載體。
二、特性不同
1、真核過表達質粒：該質粒具有很強的複製能力，可以滿足隨宿主細胞**時跟隨胞質遺傳給新生的子細胞，這是真核細胞表達載體保證目的基因穩定表達的因素之一。
2、原核過表達質粒：啟動子是dna鏈上一段能與rna聚合酶結合並起始rna合成的序列，它是基因表達不可缺少的重要調控序列。沒有啟動子，基因就不能轉錄。
由於細菌rna聚合酶不能識別真核基因的啟動子，因此原核表達載體所用的啟動子必須是原核啟動子。
三、載體構建不同
1、真核過表達質粒：，由238個氨基酸組成，分子量約為27kd。gfpgfp在包括熱、極端ph和化學變性劑等苛刻條件下都很穩定，用甲醛固定後會持續發出熒光，但在還原環境下熒光會很快熄滅。
2、原核過表達質粒：以含目的基因的克隆質粒為模板，按基因序列設計一對引物（在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點），pcr迴圈獲得所需基因片段。
8樓：匿名使用者
質粒只是小型環狀dna分子，你指的真核、原核具體是什麼？
我構建了一個基因的真核表達載體，轉染293t細胞後以空質粒pcdna3.1及未轉染質粒的孔為對照，還有一個以pbs
9樓：百浩生物
如果293t本身不表達這個蛋白的話，最大的可能是一抗質量不過關
你可以做一下免疫印跡看看。免疫組化假陽性多正常（非特異性吸附）。
免疫印跡western blotting用分子量大小來判斷，很難出假的。
10樓：伊良部一郎
是目的基因的抗體做的麼？
是不是293t本身表達這個蛋白？
11樓：匿名使用者
贏潤生物技術支援 孫永林 加**12695920
12樓：匿名使用者
題目不完整，無法作答
真核表達蛋白是分泌表達還是胞內表達
載體pet28a構建重組質粒，測序準確，轉至bl21原核表達蛋白，，怎麼也誘導不出來？同批次的bl21別人能誘導
13樓：匿名使用者
1 可能是太弱你看不出來，建議用his抗體做個western 看看是不是有條帶而看不出。
2 是不是融解性太差，建議將你的氨基酸序列做個疏水性分析。如果確實如此的話可能要重新構載體
14樓：美吉生物
換個載體試試，是經常有這種情況的，怎麼表達都表達出來，換個載體就表達出來了，你可以試下
15樓：匿名使用者
有可能是表達量太小，先做個wb驗證下
iptg濃度感覺有點大，我們實驗室最大不超過1mm,一般是0.2mm。
如果可以還是換個載體，感覺28a不怎麼好純化
請說明真核表達載體中應具備的各種元件 5
16樓：匿名使用者
是在真核生物細胞中的基因表達載體的元件麼？
如果是，元件是啟動子，終止子，複製原點，目的基因，標記基因
17樓：匿名使用者
啟動子、核糖體結合位點、克隆位點、轉錄終止訊號，以及dn**段複製起始位點
如何選擇合適的表達載體，如何選擇真核表達載體
首先，你得先確定這個3.4kb的基因是需要在原核還是真核表達系統中表達 其次，選擇好版相對應的表達系統後，再權考慮這段基因的表達產物 即蛋白 最後是否需要附加上標籤 tag 以用於後續的分離純化，以及這個標籤是加在c末端還是n末端等。最後，根據你的實驗目的確定你所需要的表達量，是採用一個含有強啟動子...
原核生物的表達系統和真核的有什麼不同
真核生物和原核生物的細胞結構和遺傳資訊存在明顯差異，在基因組結構上，原核生物結構簡單，資訊量少 真核生物結構複雜，資訊量大，在基因表達調控上，雖然二者可以在複製 擴增 基因啟用 轉錄 轉錄後 翻譯和翻譯後等多級水平上進行，但轉錄水平調控是主要的，如何實施調控，真核基因表達調控的環節。轉錄翻譯在同一場...
真核表達載體pcDNA3 1可以加上his標籤嗎
如果293t本身不表達這個蛋白的話，最大的可能是一抗質量不過關 你可以做一下免疫印跡看看。免疫組化假陽性多正常 非特異性吸附 免疫印跡western blotting用分子量大小來判斷，很難出假的。含cmv啟動子的真核載體如pcdna3.1能在黴菌或酵母中表達嗎 真核表達質粒pcdna3.1有哪些性...