怎樣驗證綠葉中的色素吸收什麼顏色的光

2021-03-07 17:38:11 字數 4235 閱讀 7367

1樓:紫冰雨的季節

提取光合色素過程

中,關鍵是速度。提取光合色素過程中,因為光合色素都是脂溶性的,因此用丙酮這種有機溶劑作為提取液,因為丙酮易揮發且有一定毒性,因此提取過程要速度要快,同時提取液要用膠塞塞好,以防止其揮發;利用二氧化矽硬度極大的特點,其粉末可增加研磨時磨擦力,加快研磨的速度;又因為葉綠素容易破壞,因此需要保護,而碳酸鈣的作用是防止葉綠素被破壞;把綠葉剪碎的目的也是為了加快研磨速度。

劃濾液細線是本實驗的結果明顯清晰的關鍵。濾液細線必須待第一次完全乾燥後才能劃第二遍,重複次數可多一些,濾液細線要齊、細、顏色深,其中齊更重要一些。

用紙層析法分離色素時,特別要注意濾液細線一定要處於層析液的上面,否則光合色素會溶解於層析液中,而不會沿層析液向上擴散、分離,這會使實驗效果極差,甚至不發生分離,導致實驗無效;另外,層析液是石油醚、丙酮、苯等有機溶劑的混合液,具有揮發性且有毒,要注意密閉。

用紅、橙黃、綠、藍紫色的薄膜,分別遮住同一光源。把盛有葉綠體的色素提取液的試管,分別放在紅、橙黃、綠、藍紫色光前、觀察這些光透過色素提取液的情況。可明顯地看到紅和藍紫色光透過的較少(暗),橙黃和綠色光透過的較多(亮)。

分析這些現象,得出葉綠體中的色素,主要吸收紅光和藍紫光。在此基礎上,出示教材中的光合色素吸收光譜曲線,分析總結光合色素吸收光波的不同特點。

2樓:

葉綠素是一種雙羧酸的酯,可與鹼發生皂化作用,產生的鹽能溶於水,可用此法將葉綠素與類胡蘿蔔素分開;葉綠素與類胡蘿蔔素都有光學活性,表現出一定的吸收光譜,可用分光鏡檢查或用分光光度計精確測定.

材料:葉片,丙酮,蒸餾水,碳酸鈣,石英砂,koh,漏斗,分液漏斗,試管,三稜鏡或分光光度計

類胡蘿蔔素與葉綠素的分離:稱取新鮮葉片2 g,放入研缽中加丙酮5 ml,少許碳酸鈣和石英砂,研磨成勻漿,再加丙酮15 ml洗,以漏斗過濾之,即為色素提取液。加到盛有20 ml乙醚的分液漏斗中,搖動分液漏斗,並沿漏斗邊緣加入30 ml蒸餾水,輕輕搖動分液漏斗,靜止10分鐘,溶液即分為兩層。

色素已全部轉入上層乙醚中,棄去下層丙酮和水,再用蒸餾水沖洗乙醚溶液1-2次。然後於色素乙醚溶液中加入8ml 30%koh甲醇溶液,用力搖動分液漏斗約5分鐘,靜置約10 min,再加蒸餾水約10 ml,搖動後靜置分離,則得到類胡蘿蔔素層和葉綠素層,分別儲存於試管中。

經過類胡蘿蔔素層的光用三稜鏡分光,光譜藍紫光區變暗證明吸收藍紫光。

經過葉綠素層的光用三稜鏡分光,光譜藍紫光區和紅光區變暗證明吸收藍紫光和紅光。

分光光度計連計算機作吸收光譜圖更結果清晰。

3樓:匿名使用者

用分光光度計

分別做4中葉綠素的比色皿,直接可測出對光譜的吸收峰,查光譜表,波長多少對應是什麼顏色,就知道色素吸收什麼樣的光的能力了.

如果你覺得太專業了看不懂,可以搜一下分光光度計是什麼東西,光譜是什麼意思,波長和可見光顏色的關係...解釋起來太麻煩..

高中生物實驗 綠葉色素的提取

4樓:匿名使用者

葉綠素提取的準備工作是在一個半暗的房間裡,室溫保持在25℃。

提取步驟如下:

(1) 取1000克新鮮的綠葉,在韋氏攪切器中粉碎。

(2)將粉碎的1000克綠葉放進加有少量的碳酸鈣的丙酮中(溫度20℃)進行萃取,直到過濾、清洗後的葉子碎片為無色。

(3)將過濾後的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100ml丙酮的漏斗中,然後輕輕地旋轉,同時加放蒸餾水直到分層為止。水層的大部分丙酮和水溶雜質被丟棄,只剩石油醚溶液。

(4)將石油醚溶液用蒸餾水再次淨化後,用含有石油醚和0.01克草酸的200ml80%的甲醇溶液清洗5次以上,最後得到黃綠色懸浮液。

(5)用無水硫酸鈉對懸浮液進行乾燥,並將其滲入到3cm厚的蔗糖粉末製成柱中,然後用石油醚清洗沉澱的色素去掉類胡蘿蔔素,使之只含有天然的葉綠素。

(6)含有天然葉綠素的蔗糖柱分兩層,綠層有4-10mm的葉綠素b層,另一藍層為2-6mm的葉綠素a層。

(7)將位於藍層正中的部分(約佔藍層的一半) 放入醚中,對此懸浮液進行過濾、洗提,用蒸餾水清洗,用硫酸鈉乾燥,再用器皿進行過濾後,得到葉綠素a。

(8)將(6)中的綠層中間部分移出,迅速放入醚中過濾、洗提,製成葉綠素b醚溶液。

5樓:黃曉鼕鼕

一般考點

1、加入二氧化矽的原因:有利於充分研磨

2、加入碳酸鈣的原因:防止色素破壞。研磨時會破壞溶酶體,溶酶體裡面的有機酸會流出來而色素中有mg,碳酸鈣能和酸反應,防止酸和鎂反應,破壞了色素。

3、加入無水乙醇的原因:光合色素易溶於無水乙醇等有機溶劑中,可以用無水乙醇提取綠葉中的光合色素。

4、層析液的作用:光合色素可溶於層析液中,不同的光合色素在層析液中的溶解度不同。溶解度高的光合色素隨層析液在濾紙上擴散得快;溶解度低的光合色素在濾紙上擴散得慢。

這樣,最終不同的光合色素會在擴散過程中分離開來。

(1)提取光合色素

用天平稱取5 g綠色葉片,剪碎,放入研缽中。向研缽中放入少量二氧化矽和碳酸鈣,加入10 ml無水乙醇(也可用丙酮),迅速、充分地研磨。在玻璃漏斗基部放一塊單層尼龍布,將漏斗插入試管。

將研磨液倒入漏斗,及時用棉塞塞嚴盛有濾液的試管。

①剪碎和加二氧化矽的作用:利於研磨充分

②加入碳酸鈣的原因:防止色素破壞。研磨時會破壞溶酶體,溶酶體裡面的有機酸會流出來而色素中有mg,碳酸鈣能和酸反應,防止酸和鎂反應,破壞了色素。

③加入無水乙醇(丙酮)的原因:光合色素易溶於無水乙醇等有機溶劑中,可以用無水乙醇提取綠葉中的光合色素。

④迅速研磨:防止乙醇揮發和色素的破壞。

⑤單層尼龍布的作用:過濾、去除雜質。

⑥用棉塞塞嚴的原因:防止乙醇(丙酮)揮發、提取液變少、變幹。

(2)製備濾紙條

將乾燥的定性濾紙剪成長與寬略小於試管長與寬的濾紙條,將濾紙條一端剪去兩角,在此端距頂端1 cm處用鉛筆畫一條細橫線。

①濾紙條的長與寬略小於試管:既能使濾紙條輕鬆地放入試管內,易於取出,也能防止濾紙條太小,彎曲塌陷在試管內。

②剪去濾紙條兩角的作用:1.保證濾紙能立在燒杯中2.保證濾紙上的濾液線能水平向上擴充套件。

③1 cm:保證濾紙條有足夠的長度泡在層析液中,又能使色素帶不浸在層析液(分離液)中。

④用鉛筆,不能用簽字筆、圓珠筆、畫筆的原因:簽字筆、圓珠筆、畫筆的筆液色素會也能溶於乙醇和層析液,汙染從綠葉中提取的色素。

(3)畫濾液細線

用毛細吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線均勻畫細線(也可用玻片較短那一端的邊緣沾取濾液後,印在濾紙條上)。待濾液線幹後,重複畫線一兩次。

①濾液線要細,要均勻:保證濾液色素在同一起始點上。

②待濾液線幹後再重複畫線的原因:既保證了濾液線的色素量,也防止濾液線過寬。畫的次數越多,色素量越多,越好跑,色素帶也就分得越開,越清楚。

(4)分離光合色素

將適量的層析液(分離液)倒入試管,將濾紙條畫線一端朝下,輕輕插入層析液中,迅速塞緊試管口。

①適量的層析液:保證足量用於色素的分離,防止層析液浸沒濾液線,也防止空氣汙染(層析液易揮發、有毒),避免試劑的浪費。

②層析液的作用:色素可溶於層析液中,不同的色素在層析液中的溶解度不同。溶解度高的色素隨層析液在濾紙上擴散得快;溶解度低的色素在濾紙上擴散得慢。

這樣,最終不同的色素會在擴散過程中分離開來。

③注意不要讓層析液觸及濾液線。接觸後會使大量濾液溶於層析液中,導致實驗失敗。

④塞緊試管口的原因:層析液易揮發,且具一定的毒性。

(5)觀察、記錄

待層析液上緣擴散至接近濾紙條頂端時,將濾紙條取出,風乾。觀察濾紙條上所出現的色素帶及其顏色,並做好記錄。

最後濾紙條上將分離出四條色素帶,顏色從上往下分別是橙黃色、黃色、藍綠色和黃綠色,四種色素分別是胡蘿蔔素、葉黃素、葉綠素a和葉綠素b。

6樓:匿名使用者

1、加入二氧化矽的原因:有利於充分研磨

2、加入碳酸鈣的原因:防止色素破壞。研磨時會破壞溶酶體,溶酶體裡面的有機酸會流出來而色素中有mg,碳酸鈣能和酸反應,防止酸和鎂反應,破壞了色素。

3、加入無水乙醇的原因:光合色素易溶於無水乙醇等有機溶劑中,可以用無水乙醇提取綠葉中的光合色素。

4、層析液的作用:光合色素可溶於層析液中,不同的光合色素在層析液中的溶解度不同。溶解度高的光合色素隨層析液在濾紙上擴散得快;溶解度低的光合色素在濾紙上擴散得慢。

這樣,最終不同的光合色素會在擴散過程中分離開來。

在用綠葉中色素的提取葉作為吸光度測定實驗時,所設定的對照組應用什麼做對照溶液?

7樓:薛定諤的蝸牛

提取溶劑,不要新增任何東西,多配提取溶劑,留著對著,吸光度分析都是這樣,溶劑要作為對照組。

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