關於質粒亞克隆的一些問題,關於質粒固化

2021-03-03 21:42:54 字數 1655 閱讀 6171

1樓:匿名使用者

一般實驗室常用的載體,都是用固定的常用雙酶切切割後將基因連進去的,所以你可以資訊師兄是用什麼內切酶位點構建的。

2樓:匿名使用者

想不pcr直接酶切,除看是否有相同的酶切位點之外,還得看兩載體相同酶切位點之間讀碼框是不是一樣。

關於質粒固化

3樓:栽梧桐等鳳凰

質粒固化有利於儲存運輸,很多做研究的老師和同學需要從國外或者很遠的地方將版質權粒取回來,由於路途運輸不便,液體儲存容易降解等原因,通常把液體質粒塗抹在濾紙上,烘乾,用記號筆標出質粒位置,快遞濾紙即可。收到後可將濾紙在蒸餾水中侵泡可重新得到液體質粒。詳細方法請參考****

ielisa.***上的詳細步驟。

4樓:匿名使用者

找了很久,其實是消除質粒的意思

關於質粒的問題

5樓:

其實你的兩個復問題是相同的。制

首先啟動子、終止子以及你的目的基因共同構成一個表達盒,只有這樣元件齊備了,才能成功合成出mrna,然後你的目的基因才能表達。此外,除了你的目的基因,質粒上可能還帶有另外一套啟動子、終止子,這個一般是表達抗性基因的。

複製原點,質粒進入細菌或細胞以後,需要進行復制,複製原點就是提供複製的起點,一般如果是真核表達質粒,可能分別存在一個原核複製起點和真核複製起點。

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6樓:匿名使用者

第一個問題:啟動子和終止子是dn**段,啟動子是rna聚合酶識別和結合的部位,有了它才能驅專動基因屬轉錄出mrna,終止子,相當於一盞紅色訊號燈,使轉錄在所需要的地方停止。複製原點:

dna的複製是由許多複製原點處形成的起始複製叉開始的。複製原點處的a和t特別多,相對氫鍵少,不穩定,dna容易解旋,因此就容易和引物結合,成為轉錄的起點或複製的起點。

第二個問題:質粒有時候不僅僅是將目的基因匯入受體細胞,比如匯入大腸桿菌中,很多目的基因就隨質粒的複製而複製,隨質粒基因的表達才表達!因此需要這些元件!

關於質粒的問題。

7樓:匿名使用者

第一個問題你說的不對。(補充說明:質粒一般是細菌細胞質基質中的小型環狀dna分子,應該無內顯子和外顯子的。

如圖:第二個問題基因工程的產物是蛋白質。

如果說基因工程匯入目的基因後市雜合子還算可以,因為目的基因是一個,整合到染色體上的dna上的話,算是雜合子吧。這樣的遺傳遵循孟德爾遺傳規律。

質粒載體的三要素

8樓:岸裡何以顧

用於克隆表達的質粒

bai載體通常涉及的三du

要素:1.複製子:zhi又稱複製起dao始區,包含控制質粒內容dna複製起點和質粒拷貝數等遺傳因素。

複製子可分為為:①嚴謹型複製子②鬆弛型複製子。

2.選擇標記:由質粒編碼的選擇標記賦予宿主細胞新的表型,用於鑑定和篩選轉化有質粒的宿主細胞。最常見的選擇標記為抗生素抗性基因,包括:氨苄西林、氯黴素、卡那黴素、新黴素

3.多克隆位點:

質粒是小型環狀dna分子,在基因工程中作為最常用,最簡單的載體,必須包括三部分:遺傳標記基因,複製區,目的基因。

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